在上一期推文中，小编介绍了“基质效应对LC-MS/MS定量的影响”，分析基质效应对生物样品定量的影响。
这一次小编就和大家对比目前常用的血液样品前处理方法的优缺点。让你可以选择合适前处理方法，有效去除基质干扰成分。
常见方法
常用的前处理方法包括液液萃取（LLE）、固相萃取(SPE)及蛋白沉淀(PP)，为达到更好的提取效率，可单独使用，也可联合处理。
LLE
液液萃取法
液液萃取法是一种高效提取、可有效去除基质干扰成分的前处理方式，但此方法需要消耗大量溶剂，且在氮吹浓缩步骤中需要消耗大量时间，极性较大的物质和离子化合物很难被提取。
SPE
固相萃取法
SPE法可获得较为干净的提取物，且回收率高。然而，SPE的方法开发通常耗时很长，而且步骤繁杂。SPE最大的缺点在于去基质效果很大程度依赖于色谱行为，即经SPE处理残留的基质成分通常具有与待测物相似的色谱行为。因而，这些残存的干扰物在与待测物的共洗脱作用下，仍可导致离子抑制。SPE还可以产生富集待测物的效果，但同时也可导致基质干扰物的富集，因此，优化SPE的处理步骤及过程变得尤为重要。
PP
蛋白沉淀法
PP作为一种生物样品前处理技术，可以去除血液样本中98%的蛋白质，但该方法沉淀效果不佳，待测物回收率低，因此常作为SPE的前处理步骤。PP不能去除生物样品中任何水溶性组分，因此基质成分得不到充分消除，且蛋白会吸附待测物质，严重时可吸附90%以上的待测物，大大降低检测灵敏度。
LLE、SPE、PP优缺点大对比
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其实，你还有更好的选择~
广东联捷自主研发的“新一代快速血药萃取利器”——eETray ，易萃血样萃取柱（盒）作为血药浓度前处理新方式，结合蛋白沉淀法的快速沉淀优势及固相萃取法的高效提取效率，采用过滤式前处理方式，仅需微量上样-沉淀过滤-收集滤液三步简单操作，实现生物样品前处理的全部过程，且重现性好、回收率高。
重现性试验
为考察该产品的结果重现性，由两位分析人员采用eETray萃取法分别对氯吡咯雷和利血平进行重复样品的回收率测定（n=8），结果显示重现性良好（RSD%＜10%）。
两位分析人员的测试结果如上图所示，结果显示，eETray血样萃取柱对氯吡咯雷、利血平的回收率均符合生物样品方法学验证的相关指导原则，且重复实验结果显示，二者测试的回收率结果的RSD(%) 均小于10%，显示结果重复性良好。
回收率实验
采用eETray萃取法及蛋白沉淀法对七个化合物（包括二甲双胍、右美托咪定、卡马西平、拉莫三嗪、西替利嗪、头孢硫脒和利血平）的加标血样进行样品前处理得到的回收率数据。
以上图表显示，七种药物在两种处理方法下，除二甲双胍外，eETray萃取法的回收率均高于蛋白沉淀法。
优势总结
1. 步骤简化，相对传统办法节省90%以上前处理时间；
2. 回收率高，绝大多数药物的回收率高于80%；
3.重现性好，与蛋白沉淀法效果近似。
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敬
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